Summary

临床检查协议检测非典型和经典刮在绵羊

Published: January 19, 2014
doi:

Summary

提供一份简短的临床检查协议,以帮助检测绵羊和山羊的经典和非典型刮刀。

Abstract

肩伤是绵羊和山羊的一种可传播的海绵状脑病(TSEs),目前诊断基于通过 验尸 检测疾病相关普里昂蛋白。除非对绵羊或山羊种群的随机样本进行积极监测,否则刮伤病例的鉴定取决于临床疑犯的报告,而临床疑犯的发现取决于个人对疾病的熟悉程度和识别与刮伤相关的临床症状的能力。在小反胃动物的神经系统疾病的差别诊断中,可能不考虑刮伤,特别是在刮伤流行率较低的国家,或者不承认它是否表现为非典型刮伤等非典型形式。为了帮助识别临床疑犯,提出了一个简短的检查方案,以评估绵羊中与营养和非营养形式的 TSEs 相关的特定临床症状的显示,这些症状也适用于山羊。这包括行为评估、视力评估(通过测试威胁反应)、普鲁里图斯(通过测试刮伤反应)和运动(有或不蒙上眼睛)。这可能导致更详细的神经学检查报告动物作为刮刀嫌疑人。它也可以用于绵羊或山羊的实验性 TSE 研究,以评估疾病进展或确定临床终点。

Introduction

刮刀是绵羊和山羊的一种可传播海绵状脑病(TSE),属于蛋白质误折叠疾病,如牛的牛海绵状脑病(BSE),鹿的慢性浪费病,以及人类的克罗伊茨费尔特-雅科布病。诊断是在死后通过检测通常在大脑中具有抗蛋白酶的普里昂蛋白的异常形式而做出的。两种主要的自然产生的刮刮形式可以区分,它们在流行病学、病理学和生化学上是不同的:古典刮刮和非典型刮刀。此外,一种具有经典刮刀样临床症状的神经系统疾病可以通过实验感染BSSE剂6,10-11在绵羊和山羊中诱发。事实上,自然发生的BSSE已被诊断为山羊3,17。通过繁殖针对普里昂蛋白基因的遗传抗药性,对经典刮刀(和羊中的BSE)的控制已经实现,但是对于非典型刮虫来说,这更加困难,它被认为是一种零星疾病,在被认为没有经典刮刀的国家被诊断出来,例如新西兰7。

刮刀是一种成年绵羊和山羊的神经系统疾病,导致行为、感觉和运动的变化,但该病是缓慢渐进的,临床症状往往不被识别,因为动物饲养员或兽医可能不熟悉临床体征,或刮伤根本不考虑在小反胃动物的神经病的差异诊断。

拟议的检查方案旨在帮助对刮刀进行临床诊断,其目的有两个:应相当简短,以便在短时间内扫描许多动物,但具体到足以检测受刮伤影响的动物,这是通过评估受刮擦影响的动物中经常遇到的临床体征而实现的。该协议是一个轻微的修改,从一个用于监测山羊的经典刮11的迹象,包括蒙住动物,这可能加剧临床症状通常不与刮刀9。

Protocol

1. 姿势评估 评估动物的姿势,同时不受干扰。 受 TSEs 影响的动物可能站立在宽阔的四肢上,可能显得驼背,或者可能站立在低头车厢中。 2. 行为评估 研究动物的行为,当被单独留下,当接近,当处理。 受 TSE 影响的动物可能与其他绵羊分开站立或不立即跟随其他绵羊,从而显示其变异的引信。 当动物接近时,它可能会逃跑和崩溃,或它崩溃到地板上时处理。强迫顺时针或逆时针盘旋可能会看到羊与非典型的刮刀。 3. 威胁响应测试 握住动物的头,以测试威胁反应:将手或几根手指朝向动物的每只眼睛几次,以引起眨眼反应,但要小心,不要触摸任何面部毛发或产生任何可能导致动物眨眼的空气湍流。 受刮伤影响的动物,尤其是非典型刮伤的绵羊,可能缺乏威胁反应。虽然威胁反应测试是作为协议一部分使用的唯一颅神经测试,但在此过程中对脸部的目视检查可能会显示其他神经缺陷的迹象,这些迹象通常不会在刮伤中看到, 例如 面部瘫痪。如果动物不眨眼以应对威胁,建议通过触摸眼睑来测试心绞痛反射,以确保动物不能眨眼不是由面部瘫痪引起的。 4. 划痕响应测试 确保动物在这个过程是平静的,因为测试不能解释在挣扎的动物。 胸腔、腰椎和囊性区域背部的划痕区域,在每个划痕发作之间暂停。 如果动物用有节奏的头部或身体动作做出反应,或在划伤某一特定区域时移动或舔嘴唇,请重复划痕测试,以确认划痕响应的可重复性。 在具有棱镜的动物中通常会产生可重复的反应,通常包括带有古典刮毛的绵羊或具有尖端刮伤形式的山羊,但通常没有反应的绵羊与非典型刮伤,除非存在其他棱镜皮肤条件或异位素。 5. 检查羊毛损失和皮肤损伤 检查皮肤。 由于刮伤通常会导致脱发,这可能是在投票,背部,臀部,胸部或腹部的一侧,由于过度摩擦或划伤,其基础皮肤看起来正常。 如果动物有机会摩擦锋利的物体,以后可能会出现擦伤。由于四肢过度咬伤,可能会出现咬伤,尤其是在四肢上。 6. 评分身体状况 通过苍白腰椎的躯干和横向过程来评估动物的身体状况。 刮伤可能导致身体状况的逐渐丧失,其中腰椎的横向过程可以很容易地单独感觉到,并且过程的末端显得尖锐。 7. 蒙住动物的双眼 用头罩遮住动物的眼睛,这可以通过使用任何不透视的袋子制成,其中一个角落被切断,允许动物呼吸。 只有在没有安全问题的情况下才释放动物,并且没有因惊恐的动物而受伤的风险:否则保持羊和研究动物运动,同时仍然控制动物。 蒙上眼睛可能会加剧前庭系统或小脑功能障碍的迹象,而动物通过视力进行补偿的能力可能会掩盖这些迹象。平衡、不协调或盘旋可能会引起损失,尤其是在临床上不起眼的羊群中,这些绵羊带有非典型刮伤。 8. 动物运动的评估 研究动物的步态和肌肉运动时,它自由移动。 不协调的特点可能是后肢的宽基运动,后肢跳跃,或在后肢过度摇摆,这可能导致绊倒或短暂坐下。 当动物不受干扰时,头部震颤的存在往往是微妙的,但在临床检查完成期间或之后可能会变得更加明显。 9. 解释 考虑这些发现对刮擦的重要性。 虽然个别迹象的存在,如对划痕、震颤、异常行为、盘旋、崩溃发作、缺氧或缺乏威胁反应的可重复反应,可能有各种原因,但这些迹象中两个或两个以上共同发生的,极有暗示绵羊或山羊的刮伤。

Representative Results

临床健康的绵羊。投票多塞特是否来自一个无刮伤的羊群, 在接种后 49 个月, 用新西兰血统的牛脑接种, 并检查。这种羊的姿势正常,行为正常,表现出正常的威胁反应(图1),对划痕测试没有反应,羊毛完好无损,身体状况很好。它被蒙上眼睛,没有运动障碍的迹象,在临床上是无足轻重的。 非典型刮羊呈现在绵羊中不孕不躁的 TSEs 形式。切维奥特从无刮刀的羊群中,从同一普里昂蛋白基因型(AHQ/AHQ)的非典型刮伤场病例中接种大脑同源性,并在接种后36个月接受检查。这种羊也有一个正常的姿势,但行为不同于其他羊在笔和圆顺时针的方向。当威胁反应被测试时,它不会闪烁。划伤不会引起任何反应,羊毛变化也很明显,但身体状况是公平的。它被蒙上眼睛顺时针转(图2),失去平衡。步态是斧头的,可以看见一个细细的头部震颤。 非典型BSSE绵羊在绵羊中呈现了具有特性特塞的棱镜形式,临床上类似于经典刮伤绵羊的临床表现。因此,不包括经典刮刀案例。投票多塞特是否从无刮羊群内接种牛非典型 (L 型) Bse 大脑均质, 并在接种后 50 个月检查。这只羊稍微驼背,往往保持后肢宽基和落在地板上时,抓住。威胁反应很弱。背部不同部位的划痕引起头部或嘴唇运动(图3),在投票中出现羊毛损失,皮肤轻微外伤。身体状况良好。蒙上眼睛后,它不愿意移动,把后端放在障碍物上以保持平衡。绵羊是轴和显示前肢超米。 图1。威胁响应测试。 对动物眼睛的手势会引起眨眼反应。 单击此处查看更大的图像。 图2。蒙上眼睛。 顺时针盘旋,用头罩蒙住羊的双眼。 单击此处查看更大的图像。 图3。测试划痕响应。 背部划伤引起嘴唇舔与头部的侧向运动 点击这里查看更大的图像。

Discussion

Scrapie 是世界卫生组织 (OIE) 列出的疾病,在没有快速可靠的 验尸 测试的情况下,它依赖于农民或兽医识别与这种疾病相关的临床症状的能力。然而,大多数刮伤病例,尤其是非典型刮伤病例,目前都是通过有针对性的 TSE 监控发现的, 通过对被屠宰或牲畜倒下的小反胃动物进行脑部检查。饲养绵羊以抵抗经典刮伤,这减少了经典刮伤病例的数量,很可能也降低了人们对这种疾病的认识,因此在绵羊神经紊乱的差别诊断中很少考虑它。非典型刮虫的流行率也很低,在欧洲4个测试中,屠宰场约有5例,每10,000个屠宰场有8个病例。此外,通常明显为脱发有或没有切除,通常被认为是刮13的特征迹象。因此,非典型刮刀12 或非普瑞克形式的卡普林刮11中观察到的没有伴随的普鲁里图斯的神经系统疾病可能不会引起 刮伤的怀疑。

此检查协议旨在通过评估与各种类型的刮刀相关的特定临床体征来识别羊身上的 TSE 临床体征(非典型和经典刮伤,后者以非典型 BSE 接种绵羊为代表,带有经典刮伤样标志)。在经典刮伤中,在研究的100多只绵羊中,表现出阳性刮伤反应(”咬反射”)的病例比例从50-77不等根据各种研究18,在高达81%的经典刮伤病例中可以观察到运动障碍。不协调也是各种自然发生的非典型刮伤病例的主要标志,通常伴有行为变化1,但自然和实验感染的非典型刮羊报告的其他迹象是盘旋和视力障碍12,15,16,这就是为什么蒙上眼睛和威胁反应的测试被纳入检查协议。评分的身体状况,例如使用6分评分系统14,使评估消瘦,这可以在刮伤影响羊5观察。虽然以前曾提出过协助在羊身上检测刮刀的临床标准,但这些标准只与经典刮刀的检测有关,并考虑到临床历史,如果动物出现在屠宰场,可能无法获得。

目前的协议允许在短时间内对许多动物进行刮擦迹象的筛查。此外,检查协议可应用于绵羊和山羊绒被的实验研究,以监测临床发病、进展和终点。然而,它并没有用适当的临床病例史记录取代更详细的身体和神经检查,随后可能还会进行辅助诊断测试(血液和脑脊液检查;如果适当的话采用更先进的成像技术),这可能需要随后排除小反胃动物中出现类似症状的各种其他情况,如代谢或炎症性神经系统疾病,脑脓肿,或肿瘤。

虽然临床检查在检测受 TSE 影响的动物方面 通常不如基于 对普里昂蛋白2,11的验尸测试敏感,尤其是在潜伏期的早期阶段,但这是目前活体动物中唯一的检测方法,与那些没有针对性监测系统来识别受 TSE 影响的小反胃动物的国家最相关。

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

提供这些动物的研究由英国食品、环境和农村事务部以及欧洲联盟(通过欧盟TSE参考实验室的资助)资助。我们感谢项目经理西蒙斯博士.M博士和杰弗里博士的支持.M。

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Cite This Article
Konold, T., Phelan, L. Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep. J. Vis. Exp. (83), e51101, doi:10.3791/51101 (2014).

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