Три новых поведенческие тесты (передняя конечность шаг чередование, постуральной испытаний нестабильность, испытаний обращение паста) для оценки функции передних конечностей после шейки травмы спинного мозга у грызунов описаны.
Рак шейки повреждение спинного мозга (CSCI) может привести к разрушительным неврологического дефицита, в том числе ухудшение или потерю верхней конечности и функции рук. Большинство повреждений спинного мозга у человека происходит в шейном уровнях. Таким образом, развитие шейки модели травмы и разработке актуальных, чувствительные поведенческие тесты имеет большое значение. Здесь мы опишем использование недавно разработанной передних конечностей шаг чередования испытания после шейки травмы спинного мозга у крыс. Кроме того, мы опишем два поведенческие тесты, которые не были использованы после травмы спинного мозга: тестовые постуральная нестабильность (НДФЛ), а также тестовые паста-обращение. Все три поведенческие тесты очень чувствительны к травме и просты в использовании. Таким образом, мы считаем, что эти поведенческие тесты могут играть важную роль в расследовании терапевтических стратегий после CSCI.
Рак шейки травмы спинного мозга (CSCI) является наиболее распространенной формой ТСМ у больных, что составляет около 62% всех ГЦБИ ( http://www.spinalcord.uab.edu ). Травмы шейного отдела спинного мозга может привести к нарушениями в верхних конечностей, а также дыхания. Недавнее исследование у пациентов с CSCI предполагает, что частичное или полное функция руку и / или стороны считается одним из основных приоритетов 1. Таким образом, разработка моделей CSCI и связанные с ними поведенческие анализы, которые легко, чувствительным и надежным, чтобы использовать является важной целью. Есть несколько полезных поведенческие тесты для оценки функции передних конечностей после CSCI у грызунов 1-17, однако, многие из этих тестов трудно использовать и требуют специального оборудования. Тесты обработки Паста были разработаны другими группами 18,19, но эти тесты требуют, чтобы животные снят в конкретных макаронных питания клеток, которые требуется долгийподготовительный период, в то время как мы предлагаем способ может быть выполнена в доме клетку животных. Ранее описанные тесты макаронные требуют значительного времени анализа и часто дорогое программное обеспечение, в отличие от испытания, описанного здесь. Цель нашего метода заключается в разработке и использовании поведенческие тесты, которые легко в использовании, надежна и не требует дорогостоящего оборудования. В частности, тест шаг чередование передних конечностей, описанный здесь позволяет исследователям оценить объем поражения в ранние сроки после травмы, предоставляя средства для создания эквивалентных групп лечения, прежде чем хроническое лечение. В этом исследовании, мы подробно три новые поведенческие тесты: (1) передних конечностей шаг чередование, (2) постуральной нестабильности, и (3) обработки макаронных изделий.
Определение правильных поведенческих тестов, чтобы использовать может быть затруднено. В самом деле, мы считаем, что никто поведенческая тест не может оценить работу передних конечностей адекватно. Поэтому мы предлагаем, используя комбинацию нескольких поведенческих тестов на задницеESS функция передних конечностей после ТСМ. Категорически говоря, следует использовать тип двигательной задачи открытым поля (например, передних конечностей опорно-двигательного масштаба, цилиндр), где животные оцениваются по использованию их передних конечностей в нормальном передвижения и специальных тестов задачи, где животные просят выполнения конкретной задачи связанных с использованием их передних конечностей (например, паста еду, постуральной нестабильности, прочность сжатия и т.д.). Поведенческие тесты, описанные здесь подробно полезны для определения степени тяжести поражения при ~ одной недели после поражения (передняя конечность шаг чередования, постуральной неустойчивости, обработки паста), эффекты одностороннего поражения на contralesional передней конечности (передняя конечность шаг чередования, постуральной неустойчивости ) и мелкой моторики движение передних конечностей (обработка паста). Зная тяжесть и последствия поражения используется также может диктовать соответствующие поведенческие тесты. Если тонкие движения моторных запястья не возможно после поражения, используя тест, который измеряет и quantifх годов использование передних конечностей лапы неуместно. Например, многие из ранее описанных испытаний обработки паста смотреть более подробно на отдельных движений цифр, однако, мы обнаружили, с тяжестью и расположения нашего травмы, это не имеет никакого значения, а вместо этого наблюдалось различий в общей размещении конечности.
Исследователи может возникнуть соблазн провести много поведенческие тесты и использовать образец них для демонстрации по результатам, однако, рекомендуется для каждой экспериментальной модели используемого пилотное исследование с целью определения соответствующих поведенческих тестов для поражения. Таким образом, важно отметить, что пользователь должен иметь по крайней мере некоторое предварительное знание типа дефицита и объема конкретного типа повреждений до принятия решения о поведенческих тестов, которые будут использованы. Оценка тяжести поражения на основе поведенческого производительности также позволяет терапевтические группы должны быть созданы с равным распределением тяжести поражения до леченияния вводят.
Рак шейки повреждение спинного мозга (CSCI) может привести к разрушительным и жизнь изменения травм у пациентов. Есть целый ряд шейки моделей с повреждением спинного мозга, разработанных на грызунах, которые используются для изучения пластичность нервных субстратов и терапевтических агентов. Разработка чувствительны, эффективным, воспроизводимым и простой в использовании поведенческие тесты для оценки функционального дефицита и восстановление после CSCI является важной целью. Здесь мы подробно описать использование трех таких поведенческих тестов: чередования конечностей, постуральная нестабильность и обработки макаронных изделий.
Травма спинного мозга у грызунов, так как в человеческой популяции, является гетерогенным травмы. Очень похожий повреждение может вызывать множество поведенческих дефицитов. Таким образом, важно определить степень тяжести поражения в травмированных животных. Мы обнаружили, что задача чередование конечностей является очень эффективным способом определения, если contralesional стороны поврежден после одностороннего травмы (гемисекции или ДАЛЕЕдиффузионных тип травмы), чтобы шейного отдела спинного мозга 19. Данные из нашей группы показал, что использование этого чередования конечностей задачи можно определить серьезность травмы в течение первой недели после травмы. Кроме того, более тяжелые ранения животные (не переменного тока), имели значительно другой профиль восстановления по сравнению с генераторами переменного тока (с помощью двигательной масштаб передних конечностей). Поэтому задача чередование конечностей является чрезвычайно полезным в группировки раненых крыс в генераторов и не-генераторов, особенно если исследование включает хронический лечение для обеспечения есть равное распределение тяжести поражения в каждой группе лечения.
Рекомендуется, чтобы тест-передних конечностей чередование быть использованы в сочетании с другими задачами, которые могут изучить использование передних конечностей животных (таких, как шкале передних конечностей опорно-двигательного аппарата или тесте предпочтений цилиндр лапы). В то время как введение этого теста крайне важно, чтобы экспериментатор выполнить тест одинаковое количество разс каждой руке (например, два раза левой рукой и дважды справа), чтобы свести к минимуму влияние экспериментатора положение рук на поведение крыс. Этот тест является эффективным только тогда, когда животное расслабился в руках экспериментатора; на 2-3 недели обработки предложенные должен позволять релаксации. Кроме того, как только животное спокойно, экспериментатор должен держать животное в почти 90 ° в тачка положении, чтобы предотвратить в пределах-животного вариации.
Тест передних конечностей-чередование может также дать представление о кросс-спинномозговых нервных связей, когда животные не в состоянии активизировать индивидуально с лапой, но в состоянии выполнить задачу чередования. Для нормальной четвероногих локомоции животных, таких как крысы, многих областях мозга, а также в центральных генераторов рисунок (ЦГ) по длине спинного мозга вовлечены. Специально для передних конечностей ритмического движения, шейного отдела спинного сегменты, С3-С6, как считается, важно 22. Ранее мы descriкровать анатомические различия между генераторами и не-генераторов в повреждениями животных (боковая гемисекции на C3/C4 была выполнена) и нашел больше вреда contralesional колонке спинной и кортикоспинальных тракта в не чередующихся животных 18. Считается, что для движения передних конечностей, ритмичный генератор модели присутствует на каждом уровне шейного геми-сегменте и что кросс-шнур ингибитор соединения отвечают за чередованием 23. Наши предыдущие анатомические данные также следует, что повреждение contralesional стороны спинного мозга может привести к нарушению в ритмической мощностью двигателя (например, чередование), тогда как, если contralesional спинного мозга является более нетронутыми, ритмические выходы двигателя, скорее всего, нормально функционировать. Мы не наблюдали значительный ущерб любых contralesional медиальных вентральной частей шнуров и, следовательно, что анализ не проводился.
Тест постуральная нестабильность, описанный здесь, вер у полезный тест, потому что это может обнаружить изменения в обоих передних конечностей (ипси-и contralesional), вызванных одностороннего поражения. Важно отметить, что этот тест следует вводить только тогда, когда животное смягчены в руки экспериментатора. По нашему опыту, это может занять ежедневный обращение с животными в течение 2-3 недель. После того, как экспериментатор и животное удобны, этот тест очень чувствителен и может быть использован для получения очень последовательные данные сдвига смещения для каждой передней конечности. Если животное напряженной, экспериментатор может мягко держать животное и переместить их вверх прочь и вниз на стол, пока животное не удобно и понимает, что таблица является безопасное место. После того, как животное спокойно, важно держать животных в тачке позиции в почти 90 ° для достижения одинаковых результатов. Этот тест легко управлять и дает представление за пределами других поведенческих тестов, предоставляя информацию о компенсации и дефицита с одной простой задачей.
т "> Крысы охотно поедают сухие макароны после тренировки в передней части камеры. Таким образом, обращение паста является относительно простой тест, чтобы управлять. В этом исследовании мы записывали и использования данных для использования конечностей (слева, справа или оба) и время есть макароны только. Более детальный анализ в том числе корректировок лап во время пасты еды была описана ранее в животных с травм, таких как односторонних ишемических поражений и одностороннего полосатого тела истощения дофамина 20,21,24. Таким образом, можно разрабатывать и использовать более . чувствительный анализ от теста макароны едят после CSCI Мы включили положение лапы на разметочное листа, так как это может выявить беспристрастности или способность с каждой стороны Кроме того, мы отмечая захват каждой лапе;. некоторые животные отдохнуть лапу на одной стороне паста, используя его, возможно, в качестве поддержки, а не захват пасту во время еды. Если животные не решаются съесть пасту, шаг лишение пищи может быть введен с протоколом до тестирования.The authors have nothing to disclose.
Мы хотели бы выразить признательность финансирование от Миссии Connect, проект TIRR Foundation (CES и ZZK), Крейга Neilsen фонда (CES) и NSF Высшей исследовательский грант (грант №: 2011112479 для SAG).
Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
Sand paper | 3M | 5097 | 3M Gold Fre-Cut Sandpaper was used. Any 220-grit sandpaper would work well |
Dry Pasta | Skinner | Skinner Thin Spaghetti was used. It is available at Walmart |