テトラサイクリン調節細胞株は、具体的に樹状細胞を標的とする高力価レンチウイルスベクターを生成

多くのベクター系は、遺伝子送達のために開発されている。レンチウイルスに基づくベクターは、最も一般的に研究ウイルスシステムの間でされています。それらは効率的に分割し、非分裂細胞¹の両方を形質導入宿主ゲノムへの組込みに起因する長期発現を達成するため^、2ほとんどのヒト集団における低天然の抗ベクトル耐性を示し、かつに対して低電位を有することができるので、これらのベクターは、有利で ​​ある挿入突然変異^3,4から遺伝毒性。

レンチウイルスの産生は、常に安全性の懸念に彩られています。レンチウイルスベクターは、一般に、HIV-1、AIDSの病原体から誘導される。 lentivectorの個々の成分（転写、エンベロープ、およびパッケージングプラスミド）の一過性トランスフェクション実験室の設定で遺伝物質を送達する一般的で柔軟な手段である。しかし、臨床応用のためのスケールアップ一過性トランスフェクションは、面倒でmAですyは複製能レンチウイルス^5,6の開発につながる。これらのハードルを克服するために、いくつかの安定したパッケージングおよびプロデューサー細胞株は^6-11開発されている。これらのいずれかの行、GPR包装ライン^11は 、テトラサイクリンにより調節される魅力的な利点を有する。本稿では、特に樹状細胞（DC-の^LV）12に向けて対象としている自己不活性化レンチウイルスベクターを製造するためにこのシステムを適応させる方法を示しています。

樹状細胞（DC）は、免疫システムの中で最も堅牢な抗原提示細胞である。それらは、直接、プログラムを開始し、腫瘍特異的免疫応答^を調節する¹³ため、それらは、癌ワクチン開発に大きな関心の対象となっている。 DCは、ペプチド又はDNAワクチンよりも強い抗腫瘍免疫応答を誘発する可能性を秘めている含むようにワクチン接種プロトコルを組み込む。最近、我々はレンチウイルスベクターを開発したことspecificallyは修正されたシンドビスウイルス糖タンパク質、SVGmu ¹⁴を通じて樹状細胞をターゲットとしています。これらのベクターは、それらが樹状細胞に高い特異性を示し、非特異的、VSVG偽型ベクターより強い免疫応答を生成するという点でユニークです。

ここでは、これらのDC-標的化レンチウイルスベクターを大量に製造する方法を報告している。我々は、これらのDC-DCを論理ボリュームが感染し、強力なCD8 ⁺ T細胞免疫応答を生成することができることを実証している。動物に関わるすべての手順は、USC Intitutional動物のケアと使用委員会の承認の下に、人道的に行われた。 インビボおよび臨床実験で行うためには、高力価でウイルスを生産する細胞株を作成することが重要である。ここで説明しているとおりに伝達し、トランスフェクションの手順を実行すると、このようなクローンを生成する可能性を最大化します。