四环素调节细胞株产生高滴度的慢病毒载体，专门针对树突状细胞

已经开发了许多载体系统的基因传递。基于慢病毒载体已跻身研究最常用的病毒系统。这些载体是有利的，因为他们可以高效转染分裂和非分裂细胞^1，由于整合到宿主基因组实现长期表达，表现出低的天然抗载体在大多数人群的免疫力，并具有低潜力从插入突变^3,4的遗传毒性。

慢病毒的生产安全问题一直着色。慢病毒载体一般是来自于HIV-1，艾滋病的病原体。单个元件的慢病毒（转让，外壳和包装质粒）的瞬时转染是一种常见的和灵活的方法，在实验室设置中提供的遗传物质。然而，扩大规模的临床应用瞬时转染是繁琐和马的Ÿ导致复制能力的慢病毒^5,6的发展。要克服这些障碍，稳定的包装和生产细胞系已开发^6-11。这些线路之一，探地雷达的包装生产线^11，受四环素有吸引力的优势。在本文中，我们将演示如何适应这种系统产生自我失活的慢病毒载体，是专门面向树突状细胞^{（DC-LVS）12。}

树突状细胞（DC）是最强大的抗原呈递细胞的免疫系统。他们已经在癌症疫苗开发的主题极大的兴趣，因为它们直接启动，程序和规范肿瘤特异性免疫反应^13。装有包括区议会有可能引出更强的抗肿瘤免疫反应比肽或DNA疫苗的接种方案。最近，我们已经开发出一种慢病毒载体，specificallÝ针对树突状细胞，通过修改辛德毕斯病毒糖蛋白，SVGmu ^14。这些载体是独特的，他们表现出高特异性树突状细胞，并产生更强的免疫反应比特异性，VSVG假型载体。

在这里，我们报告的方法产生大量的这些直流针对性的慢病毒载体。我们表明，这些DC-LVS可以感染区议会和产生强烈的CD8 ^{+ T}细胞的免疫反应。所有程序涉及动物的人道待遇，执行下USC Intitutional动物护理和使用委员会批准。为了执行在体内和临床实验，这是至关重要的建立的细胞系，可以制作高滴度的病毒。执行转导和转染与所述的相同的步骤，将产生这样的克隆的机会最大化。