흑색종과 편평상피암 줄기세포를 이용한 새로운 수지상 세포 백신의 생성
Summary
합성 면역 능력 호스트에서 평가, 암 줄기 세포 (CSC) 기반 수지상 세포 (DC) 백신은 이질 적인 대량 종양 세포와 펄스 전통적인 DC 백신 보다 상당히 높은 항 종양 면역을 입증.
Abstract
우리는 암 줄기 세포 (CSC)-농축 된 인구는 Murine 흑색종 D5 합성C5/6 마우스와 편평상피암 SCC7 합성을 알데플루OR/ALDH를 마커로 사용하여 C3H 마우스에 합성, 맥박 세포에 항원 용액의 소스로 세포 용해성을 테스트 (DCs). ALDH높은 CSC lysates와 펄스 된 DC는 모델 과 폐 전이 설정 및 s.c 모두에서 분류되지 않은 전체 종양 세포 리스의 lysates로 펄스 DC보다 훨씬 더 높은 보호 항종양 면역을 유도한다. 종양 성장 설정, 각각. 이 현상은 CSC 백신 유도 된 유머뿐만 아니라 세포 항 CSC 반응 때문이었다. 특히, CSC-DC 백신을 실시하는 호스트로부터 분리된 비장세포는 분류되지 않은 종양 세포 용해 펄스-DC 백신을 실시하는 숙주로부터 분리된 비장세포보다 훨씬 더 많은 양의 IFNγ 및 GM-CSF를 생산하였다. 이러한 결과는 보조 제 환경에서 임상 사용을 위한 자가 CSC 기반 치료 백신을 개발하는 노력을 지원합니다.
Introduction
암 줄기세포는 종래의 화학요법 및 방사선 요법에 상대적으로 저항력이있다 1,2. 한편, 세포의 이 인구는 전통적인 암 치료1-4후에 암의 재발 그리고 진행을 책임지는 세포일지도 모릅니다. 암 줄기 세포에 분화 한 종양 항원의 발현의 부족으로 인해, 암 줄기 세포는 주로 분화 된 종양 세포에 항원을 대상으로 설계 암에 대한 치료의 현재 면역 학적 개입을 탈출 할 수있다. 따라서, 암줄기세포를 구체적으로 표적으로 하고 파괴하는 새로운 전략의 개발은 현재암 치료의 치료 효능을 증가시키는 약속을 지킬 수 있다. 이를 위해, 우리는 2개의 동물종양 (흑색종 D5 및 편평세포 암 SCC7)에서 암 줄기 세포 (CSC)를 풍부하게 한 인구를 격리하고, CSC-TPDC 백신을 준비하기 위하여 항원 제시 세포 (수지상 세포, DC)를 펄스하는 항원 근원으로 이용했습니다. 그런 다음 합성 면역 능력 호스트, B6 마우스 및 C3H 마우스에서 CSC-TPDC 백신에 의해 유도된 항종양 면역을 각각 평가하였다. CSC-TPDC 유도 항종양 효능은 이전에 우리 그룹5,6에서사용되어 온 분류되지 않은 이질성 종양 세포(H-TPDC)로부터 용액으로 펄스된 기존의 DC 백신과 비교되었으며, 다른조사자들(7)은 전임상 연구와 임상 시험 모두에서 비교하였다.
Protocol
Representative Results
Discussion
SCID 마우스와 같은 면역 손상된 호스트는 호스트 내의 적응성 면역의 부족으로 인해 CSC의 면역 학적 평가를 배제합니다. 이 연구에서는, 우리는 면역 무능한 호스트에 있는 CSCs의 면역genicity를 평가했습니다, 이는 환자 설정을 더 밀접하게 모방할 수 있었습니다. 농축 된 CSC는 면역 원소이며 선택되지 않은 종양 세포 용해 성 DC에 비해 백신으로 그들의 lysates가 DC에 로드될 때 보다 효과적인 종양 보호 면역을 유도할 수 있습니다. 기계적으로, 보호는 CSC 반응성 항체 및 T 세포8의 선택적 유도뿐만 아니라 IFNγ 및 GM-CSF와 같은 타입-1 사이토카인의 생산에 의해 부여되었다.
수지상 세포 기반 백신 및 입양 T 세포 전달을 포함한 현재 면역 요법의 대부분은 종양-분화 항원들을 표적으로 하기 위해 고안되었습니다. 이러한 분화된 항원들을 발현하지 않을 수 있는 CSCs는 그러므로 이러한 면역학적 표적을 피할 수 있다. 대조적으로, 암줄기세포를 구체적으로 표적으로 하기 위하여 설계된 CSC 백신은 암세포의 이 특별한 인구를 파괴하고, 따라서 종양 재발 및 전이를 방지해서 백신의 치료 효험을 향상시킬 수 있다.
배양된 종양 세포와 갓 수확한 종양 모두에서, 우리는 높은 알데히드 탈수소 효소 활성에 기초한 혈류 세포측정에 의하여 CSC 농축 인구를 확인했습니다. 이러한 ALDH고세포는 CSC-TPDC를 생성하는 CC-TPDC를 생성하는 항원 소스로 사용되는 흐름 분류에 의해 단화될 수있다. 이 결과는 배양된 종양 세포에서 또는 임상 신청을 위한 갓 수확한 종양에서 고립된 CS를 사용하는 잠재력을 밝혔습니다.
임상적으로 관련성이 있기 위해서는 치료 환경에서 백신을 검사해야 합니다. 이 실험은 지금 우리의 실험실에서 수행되고 있습니다.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 미시간 대학 종합 암 센터의 윌과 Jeanne Caldwell 부여 연구 기금에 의해 지원되었다 부분적으로 NIH 보조금 CA82529 및 길슨 Longenbaugh 재단에 의해.
Materials
| ALDHEFLOUR KIT | Stemcell Technologies | 1700 |
| Murine IL-4 | Pepro Tech | 214-14 |
| Murine GM-CSF | Pepro Tech | 315-03 |
| Mouse IFN-ɣ ELISA KIT | BD Biosciences | 555138 |
| Mouse GM-CSF ELISA KIT | BD Biosciences | 555167 |
| OptiPrep Density Gradient Medium | Sigma Aldrich | D1556 |
| BD OptEIA TMB Substrated Reagent Set | BD Biosciences | 555214 |
| Equipment | ||
| BD FACS Aria Cell Sorter | BD Biosciences | 336834 |
| Kcjunior | Bio-Tek Instruments | 176058 |
References
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