التهاب القرنية العقبولي المتكررة اللحمية في الفئران، وهذا نموذج لدراسة الإنسان HSK
Summary
معظم الدراسات من مرض القرنية الهربسي استخدام نموذج العدوى الأولية. ومع ذلك، العدوى الأولية مع HSV-1 لا يؤدي عادة إلى الأمراض التي تصيب البشر. نحن هنا وصفا لنموذج متكرر من مرض القرنية الهربسي، الذي يحاكي بشكل وثيق الأمراض التي تصيب البشر.
Abstract
العقبولية أمراض العيون، ووصف التهاب القرنية الهربسي اللحمية (HSK)، هو عدوى محتملة المسببة للعمى القرنية الذي يؤدي إلى أكثر من 300،000 زائر كل عام السريرية للعلاج. وبين 1 و 2 في المئة من هؤلاء المرضى يعانون من مرض السريرية تجربة فقدان الرؤية في القرنية المصابة. الغالبية العظمى من هذه الحالات هي نتيجة لإعادة تنشيط العدوى الكامنة لمن الهربس البسيط من النوع I فيروس وليس بسبب مرض حاد. ومن المثير للاهتمام، والعدوى الحادة هو النموذج الأكثر استخداما لدراسة هذا المرض. ومع ذلك، كان هناك شعور بأن نموذج المتكررة من HSK سيكون أكثر تعبيرا عن ما يحدث أثناء المرض السريري. وقد استخدمت نماذج حيوانية المتكررة لHSK كل الأرانب والفئران. ميزة الأرانب هو أنها تجربة تنشيط من الكمون غياب أي حافز المعروفة. وقال أنه من الصعب استكشاف الدور الذي تلعب العديد من العوامل المناعية في HSK المتكررة لنموذج الأرنب لا يملك إمانological والموارد الوراثية أن الفأر لديه. اخترنا لاستخدام نموذج الفأر لHSK المتكررة لأنه له ميزة كونه هناك العديد من الموارد المتاحة وأيضا نعرف متى سيحدث تنشيط لأن الناجمة عن التعرض لتنشيط UV-B الخفيفة. حتى الآن، وقد سمح هذا النموذج تلك المختبرات استخدامه لتحديد العوامل المناعية التي تعتبر مهمة عدة لهذا المرض. وقد سمح ذلك أيضا لنا لاختبار كل العلاجية ونجاعة اللقاح.
Protocol
Discussion
نموذج متكرر من التهاب القرنية الهربسي اللحمية (HSK) الموصوفة هنا تمكن المحقق لدراسة HSK الإنسان في النموذج الذي هو أكثر اتساقا مع ما لوحظ خلال الأمراض التي تصيب البشر. وهكذا، نقاط القوة للنموذج هي أن المرض يحدث في سياق نظام المناعة لديها بالفعل خلال حفز المرض الأساسي. وب…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
فإن الكتاب أود أن أشكر الدكتور جاي Pepose لمساعدة تدريس نموذج لنا. وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح EY11885 (PMS)، EY21247 (PMS) ومنحة من البحوث غير المقيد للوقاية من العمى لقسم العيون.
Materials
| DMEM | Sigma | D5796 |
| Fetal Bovine Serum | Atlanta Biologicals | S11150 |
| Human Serum | Sigma | S7023 |
| L-Glutamine | Cellgro | 25-005-C1 |
| Pen/ Strep | Sigma | P4333 |
| Fungizone | Invitrogen | 15290018 |
| Centrifuge | Sorvall | Legend RT |
| Centrifuge | Beckman | 52-21 |
| Transilluminatior | UVP | 95-0452-02 |
| Sonicatior | Branson | Sonifier 450 |
| Oak Ridge Tubes | Nalgene | Z 720410 |
| Flasks- 7150 | Corning | 430823 |
| Plates- 12 well | Corning | CLS 3513 |
| Plates- 48 well | Corning | CLS 3548 |
| Sterile Conical Tubes- 30 ml | Corning | CLS 430828 |
| Sterile Cotton-tipped Applicators | Fisher | 23-400-125 |
| 30G Needles | Becton-Dickinson | 305106 |
| 25G Needles | BD | 305122 |
| 10 ml Syringe | BD | 309602 |
| 10 ml Syringe | BD | 309604 |
References
- Shimeld, C., Hill, T. J., Blyth, B., Easty, D. An improved model of recurrent herpetic eye disease in mice. Curr. Eye Res. 8, 1193-1205 (1989).
- Shimeld, C., Hill, T. J., Blyth, W. A., Easty, D. L. Reactivation of latent infection and induction of recurrent herpetic eye disease in mice. J. Gen. Virol. 71, 397-404 (1990).
- Shimeld, C., Hill, T. J., Blyth, W. A., Easty, D. L. Passive immunization protects the mouse eye from damage after herpes simplex virus infection by limiting spread of virus in the nervous system. J. Gen. Virol. 71, 681-687 (1990).
- Laycock, K. A., Lee, S. F., Brady, R. H., Pepose, J. S. Characterization of a murine model of recurrent herpes simplex viral keratitis induced by ultraviolet B radiation. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 32, 2741-2746 (1991).
- Keadle, T. L., Stuart, P. M. IL-10 ameliorates corneal disease in a mouse model of recurrent herpetic keratitis. Microbial Path. 38, 13-21 (2005).
- Keadle, T. L., Laycock, K. A., Miller, J. K., Hook, K. K., Fenoglio, E. D., Francotte, M., Slaoui, M., Stuart, P. M., Pepose, J. S. Efficacy of a recombinant glycoprotein D subunit vaccine on the development of primary and recurrent ocular infection with herpes simplex virus type 1 in mice. J. Inf. Dis. 176, 331-338 (1997).
- Keadle, T. L., Laycock, K. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Proinflammatory cytokines IL-1 and TNF-a are required for recurrent herpetic keratitis in NIH mice. Invest. Ophth. Vis. Sci. 41, 96-102 (2000).
- Keadle, T. L., Usui, N., Laycock, K. A., Kumano, Y., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Corneal cytokine expression in a murine model recurrent herpetic stromal keratitis. Ocular Immunol. Inflam. 9, 193-205 (2001).
- Keadle, T. L., Morris, J. L., Pepose, J. S., Stuart, P. M. CD4+ and CD8+ cells are key participants in the development of recurrent herpetic stromal keratitis in mice. Microbial Path. 32, 255-262 (2002).
- Keadle, T. L., Morrison, L. A., Morris, J. L., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Therapeutic immunization with a virion host shutoff-defective, replication-incompetent herpes simplex virus type 1 strain limits recurrent herpetic ocular infection. J. Virol. 76, 3615-3625 (2002).
- Keadle, T. L., Laycock, K. A., Morris, J. L., Leib, D. A., Morrison, L. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. Therapeutic vaccination with vhs(-) herpes simplex virus reduces the severity of recurrent herpetic stromal keratitis in mice. J. Gen. Virol. 83, 2361-2365 (2002).
- Keadle, T. L., Morris, J. L., Stuart, P. M. The effects of aminoguanidine on primary and recurrent ocular herpes simplex virus infection. Nitric Oxide. 13, 247-253 (2005).
- Stuart, P. M., Morris, J. E., Sidhu, M., Keadle, T. L. CCL3 protects mice from corneal pathology during recurrent HSV-1 infection. Front. Biosci. 13, 4407-4415 (2008).
- Keadle, T. L., Alexander, D. E., Leib, D. A., Stuart, P. M. Interferon gamma is not required for recurrent herpetic stromal keratitis. Virology. 380, 46-51 (2008).
- Carr, D. J., Austin, B. A., Halford, W. P., Stuart, P. M. Delivery of Interferon-gamma by an adenovirus vector blocks herpes simplex virus Type 1 reactivation in vitro and in vivo independent of RNase L and double-stranded RNA-dependent protein kinase pathways. J. Neuroimmunol. 206, 39-43 (2009).
