Eau (Cadence) Des variantes peu profondes de tests de labyrinthe d'eau chez la souris

1. Les pataugeoires Oxford La pataugeoire a été faite selon trois modèles successifs, Mk 1-3. Toutes les employer (2 cm) d'eau peu profonde contenue dans un (pour améliorer son aversion) base blanche, qui est entourée par des murs transparents en plexiglas ou en plastique acrylique transparent. Ceux-ci ont des sorties vrai / faux fixés en eux. Les fausses sorties sont occlus par des bouchons en bois peintes en noir, tandis que la vraie sortie est ouvert et relié à un tuyau en plastique noir qui peut être enlevé avec la souris à l'intérieur. La souris est alors rapidement et sans traumatisme retourné dans sa cage à la maison tandis que l'intérieur du tuyau. Après la première publication de la pataugeoire, il a été signalé que le retour à la cage d'origine a également été un facteur de motivation efficace pour l'apprentissage du labyrinthe Lashley III 2. Une température de l'eau de 20 à 25 ° C est utilisé. 20-21 ° C est idéale, il a été constaté que certaines souris semblent moins motivés à des températures plus élevées. contenu "> Le premier labyrinthe 5 était circulaire. Cependant, parfois, des souris (en particulier ceux avec des lésions à l'hippocampe) semblent ne pas remarquer le tube de sortie ouverte. Un design octogonal, avec les tubes de sortie placés dans les coins de manière à attirer l' attention des souris, grandement amélioré ce problème. Cependant, le taux d'erreur à l'exécution du hasard serait 4/trial, par opposition à 6/trial avec la conception circulaire de 12 tube. Par conséquent, une piscine dodecagonal est maintenant utilisé avec 11 faux et 1 vraie sortie défini dans les angles formés par les jonctions des parois. 1.1. Evolution et caractéristiques des pataugeoires Mc 1, un bassin circulaire de 85 cm de diamètre avec 12 sorties vrai / faux (figure 1). Mc 2, une piscine octogonale de 86 cm de diamètre avec 8 sorties vrai / faux fixés dans les coins. Mc 3, un (12 faces) piscine dodecagonal 120 cm de diamètre, avec 12 sortie vrai / faux définies dans le maïsERS (Figure 4). Dans tout ce qui précède (et le labyrinthe en Y pataugeoire, voir ci-dessous), les tubes de sortie sont de 40 mm de diamètre. Cependant, on a parfois senti que les souris étaient réticents à entrer, et les performances de contrôle dans le labyrinthe en Y seraient parfois plonger après avoir été réagissent bien. Par conséquent, et compte tenu de la facilité avec laquelle ils sont entrés dans l'appareil terriers (voir publication JOVE «Évaluation des terriers, la construction du nid et la thésaurisation chez la souris"), que les orifices de sortie dans le labyrinthe Barnes ont un diamètre de 50 mm, il a été jugé si 40 mm était trop petit. Un test a été effectué dans la cage d'accueil de six souris C57BL / 6. (Ils semblent plus prêts à entrer 40 mm tubes dans la cage à la maison comme vraisemblablement stress est plus faible ici que dans une pièce de l'appareil, afin de faire le test dans la cage d'origine permettrait de réduire les différences dans la saisie si les tubes plus petits étaient légèrement aversif, rendant le tester plus conservatrice). Deux tubes de 40 mm et deux tubes de 50 mm ont été placés sur le sol dans unmotif alterné. Comme prévu, il y avait plus d'entrées dans des tubes de 50 mm (28 entrées) à 40 mm (9 entrées). Essais pilotes sont donc prévues sur un nouveau labyrinthe en Y avec des tubes de sortie de 50 mm, en cas de succès les vieux tubes de 40 mm sur la piscine et la pataugeoire dodecagonal labyrinthe en Y seront remplacés par de nouveaux mm ceux 50. Comme la pataugeoire, bassin labyrinthe en Y et spatiale nouveauté labyrinthe en Y sont tous les tests spatiaux, en s'appuyant sur les indices de chambre qui la souris voit à travers les parois transparentes de l'appareil, la pièce doit être bien meublé avec des indices distinctifs (par exemple, les étagères, placards, des formes en plastique noir sur les murs). 2. Exécution de la pataugeoire Placez la souris au centre de la piscine face à l'une des quatre positions sur le périmètre (9, 12 ou 03 heures si le tube d'échappement est à 6 heures). Le placement est semi-aléatoire, et un maximum de trois essais consécutifs peut être dans la même direction. Cela peut être difficile à réaliser dans la pratique, parce quel'apprentissage se déroule les souris ont tendance à s'orienter vers la bonne sortie car ils sont descendus dans la piscine par la queue. S'ils le font fortement aucune tentative ne devrait être faite pour les forcer dans la position prévue, car ils sont tout simplement démontrer l'apprentissage. Relâchez-les quand ils sont juste au-dessus de l'eau, comme ils tombent dans et instantanément savent qu'ils ne sont plus détenus. Lentement, les libérant des résultats en eux qui luttent pour se libérer et cela peut nuire à l'orientation initiale. Cela vaut également pour le labyrinthe en Y pataugeoire. Longueur d'essai maximale est de 60 sec. Si la souris ne parvient pas à échapper à ce moment-là, guider manuellement vers la sortie en utilisant un couple de palettes de plexiglas clair, chacune mesurant environ 30 x 20 cm. Les mesures prises sont le temps de trouver la sortie (définition: tous de la tête dans le tube) et les erreurs. Des erreurs ont été définis comme relevant de la longueur de la tête d'un tube (y compris la vraie sortie). En passant près de la sortie réelle, sans entrée, se produit généralement infrequently après les premiers essais. Même si une affaire peut être faite que c'est un problème, un autre point de vue est que les souris déficientes en cognition spatiale font cela parce qu'ils ne savent pas qu'il ya une sortie dans les environs. Les contrôles ne savent, et donc d'enquêter plus à fond. Un plafond de 11 erreurs / Trial est imposée sur le nombre d'erreurs dans l'analyse, pour éviter trop de biaiser les données. Cela permettrait d'atténuer contre un déficit être trouvé chez les souris déficientes dans l'espace, c'est à dire qu'il s'agit d'une mesure conservatrice. Les souris qui ne parviennent pas à atteindre la sortie dans les 60 secondes se voient attribuer un score de 11 erreurs pour ce procès. Donc 60 sec fois ont toujours 11 erreurs. 3. La Cadence labyrinthe en Y Pour simplifier la procédure de la pataugeoire et l'appareil, il a été décidé d'expérimenter un labyrinthe en Y, exploité selon les mêmes principes que les pataugeoires. L'appareil se compose de trois bras en polystyrène transparent ou en plexiglas, chaque 30x 8 x 20 cm. Ceci est montée sur une base blanche (figure 7). Blanc a été choisi pour maximiser l'agressivité de la couleur du sol et ainsi encourager échapper à la faible profondeur (2 cm de profondeur). Comme dans le labyrinthe d'eau, il n'y a qu'une seule vraie sortie, avec les deux autres bras se terminant par de fausses sorties qui regardent la même chose à l'intérieur du labyrinthe (figure 8). L'exécution de la pataugeoire labyrinthe en Y Placer une souris à l'extrémité d'un des bras fermés, faisant face à l'écart du centre. La séquence des bras choisies comme la position de départ est défini par une séquence semi-aléatoire; pas plus de trois essais consécutifs avec la même position et le même nombre de bras gauche ou de droite. Chaque essai dure 60 sec. Si la souris ne parvient pas à sortir (tête entière dans le tube de sortie) dans ce délai, l'encourager à entrer dans le bras à l'aide d'un morceau de plexiglas transparent. La base de la sortie bras est bloqué par le plexiglas et la souris a permis trouve la sortie en elle-même, ce quidevrait encourager un meilleur apprentissage que de pousser les choses dans le tube. Mais il faudra peut-être recourir à si la souris est réticent à entrer dans le tube après 15 sec. Prendre des mesures de la durée totale de sortie et le nombre d'erreurs (tout le corps sauf la queue entre un bras aveugle). Marquant le bassin labyrinthe en Y Il existe deux définitions d'un procès correct: d'une part celui dans lequel la souris trouve la sortie en <60 sec et ne fait pas d'entrées dans les bras morts, les erreurs étant marqué si les armes aveugles sont inscrits et / ou si la sortie ne se trouve pas dans les 60 sec. Cette analyse confond échecs pour commencer à bouger avec des erreurs dans les entrées de bras. Deuxièmement, une analyse des procès qui met l'accent sur ​​la capacité cognitive peut être effectuée en excluant, pour chaque souris, tous les procès où la souris n'a pas quitté le bras de départ dans les 60 secondes, (c.-à supprimer les 0 +60 scores) puis à calculer le% de réponses correctes de l' restant essais. 4. Deux types de labyrinthe en YCombiné 1. Appareil Lors de la construction d'un labyrinthe en Y pagayer, il est utile d'intégrer deux portes pour lui permettre d'être exécuté comme un (sec) spatiale expérience de la mémoire de nouveauté 6 (figure 13). Une porte guillotine transparent recouvre le trou de sortie dans la paroi d'extrémité du bras de sortie, tandis qu'un porte guillotine opaque peut être insérée pour assurer l'étanchéité d'un bras des deux autres au cours de la phase de prélèvement de l'essai. Il est important que les coureurs de ces portes ne sont pas à la portée de la souris, car autrement ils peuvent détourner leur attention, car ils apparaissent voies d'évacuation potentiels. Idéalement, ils devraient s'étendre 7 cm à partir du haut de la paroi du labyrinthe. 2. Set-up Placez une couche mince (0,5 cm) de la puce litière de bois sur le sol de la Y-labyrinthe. Ceci est redistribuée entre les deux phases de test pour chaque souris, et entre les souris. Pour les meilleures pratiques, pour rendre l'environnement olfactif more similaire pour les premiers contre ultérieure souris, placer un ou deux souris non-expérimentales dans le labyrinthe pendant quelques minutes avant l'expérience commence. 3. Procédure Avec le bras de sortie étant fermée par la porte opaque et son trou de sortie est bloqué par la porte transparent, placer la souris dans la branche de départ (l'un des deux bras de non-sortie du labyrinthe) et lui permettre d'explorer pendant 5 min. Puis enlever, soulever la porte opaque pour permettre l'accès à tous les trois bras, remplacez-le dans le bras de début et l'observer pendant 2 min. Notez le nombre d'entrées et le temps passé dans chaque bras. Les souris témoins doivent se rappeler que les deux premiers bras, et passer plus de temps dans le bras jusque-là inaccessibles.