효소 링크된 Immunospot 분석 (ELISPOT) : 미생물 항원 반대 예뻐 - 1 세포 면역 반응의 부량
Summary
특발성 질환에 적응 면역의 미생물 목표 식별은 효소 연결된 immunospot 분석을 사용하여 수행할 수 있습니다.
Abstract
적응성 면역은 세포 내 병원균의 통관하는 중요한 구성 요소입니다. 인간이 반응을 감지하고 계량하는 능력은 중요한 진단 도구입니다. 효소 링크된 immunospot 분석 (ELISPOT)는 등 HIV 감염, 이식있는 사람으로 immunosuppressed 인구 및 스테로이드 사용을 포함한 미생물의 항원, 세포 면역에 대한 답변을 식별하는 능력에 대한 인기를 얻고있다. 이 분석은 면역 특정 미생물 항원에 대한 반응뿐만 아니라, 이러한 반응은 성격 Th1 또는 Th2 경우에는 구별을 계량하는 능력이 있습니다. ELISPOT은 염증의 사이트에 국한되지 않습니다. 그것은 주변 혈액뿐만 아니라 bronchoalveolar 세척, 대뇌 척수, 그리고 복수와 같은 적극적인 참여의 사이트 내에서 면역 반응에 대한 평가 능력에 다재 다능한 것입니다. 단일 또는 여러 항원에 대한 면역 반응의 검색이 가능합니다뿐만 아니라, 미생물 단백질 내의 특정 epitopes. 이 분석은 시간이 지남에 따라 면역 반응의 검출뿐만 아니라 호스트 T 세포에 의해 인식 항원의 구분을 용이하게합니다. 듀얼 컬러 ELISPOT assays의 두 크린 시토킨의 동시 표현의 검색이 가능합니다. 이 기술에 대한 최근의 애플 리케이션 extrapulmonary 결핵의 진단뿐만 아니라 면역 질환 감염성 항원의 공헌에 대한 조사를 포함합니다.
Protocol
Discussion
ELISPOT 분석은 인간의 면역 반응을 모니터링하는 가장 중요하고 널리 사용 assays의 하나로서 등장과 다른 종의 다양한 있습니다. ELISPOT 분석과 함께, 면역 세포 주파수는 세포 집단의 확장이나 조작없이 단일 세포 수준에서 측정할 수 있습니다. ELISPOT 분석 널리 감염증, 암, 알레르기 및 면역 질환 등 다양한 질병의 항원 특정 면역 반응을 조사하기 위해 적용되었습니다. 이 분석의 응용 프로그램은 ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
연구 자원, 보건 국립 연구소를위한 국립 센터에서 밴더빌트 CTSA 부여 한 UL1 RR024975에 의해 부분적으로 지원. 이 작품은 NIH R01 HL 83839에 의해 투자되었다; R01 AI 65,744합니다.
Materials
A. Preparation of Media
B. Preparation of Tris Buffer
- Add 800 ml of ddH2O to 1 L beaker.
- Measure 12 grams of Tris and add to the beaker.
- Add 0.12 grams of magnesium chloride hexahydrate (MgCl2:6H2O) into the beaker.
- Stir with magnetic stirring rod on automatic stirring plate.
- Once dissolved, pH the solution to 9.5.
- Add 200 mL of ddH2O to the beaker, bringing it up to 1000mL.
- Filter the solution with a 0.22 μm filter.
C. Materials necessary for ELISPOT analysis:
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