تصور الأعصاب القطاعي اليرقات في 3 الثالثة طور مرحلي ذبابة الفاكهة التحضيرات اليرقات
Summary
يرقات ذبابة الفاكهة السوداء البطن توفير نظام النموذج المثالي للتحقيق في آليات النقل داخل محواري الأعصاب قطعي اليرقات. باستخدام هذا الإجراء ، يمكن مقارنة 3 اليرقات طور مرحلي الثالثة تحمل طفرات مختلفة ليرقات النوع البري.
Abstract
ذبابة الفاكهة السوداء البطن في الظهور كنظام نموذج قوية لدراسة تطوير وظيفة من وظائف الجهاز العصبي ، وخصوصا بسبب الوراثة لها مريحة وتسلسل الجينوم الكامل. بالإضافة إلى ذلك ، فإن النظام العصبي اليرقات هو نظام نموذج مثالي لدراسة آليات النقل محواري كما تحتوي على أعصاب اليرقات قطعي حزم من المحاور مع الهيئات التي تقع داخل الخلية على المخ والأعصاب الطرفية التي تنتهي على طول الجسم. نحن هنا وصف الإجراء لرؤية البروتينات حويصلة متشابك داخل الأعصاب قطعي اليرقات. إذا فعلت بشكل صحيح ، وجميع مكونات الجهاز العصبي ، جنبا إلى جنب مع أنسجة المرتبطة بها مثل العضلات وNMJs ، ما زالت سليمة ، سليمة ، وجاهزة للتصور. يتم تشريح 3 اليرقات طور مرحلي الثالثة تحمل طفرات مختلفة ، الثابتة ، وحضنت مع الأضداد حويصلة متشابك ، وتصور بالمقارنة مع نوع اليرقات البرية. ويمكن تكييف هذا الإجراء لعدة أجسام مختلفة متشابك أو العصبية والتغيرات في توزيع مجموعة متنوعة من البروتينات يمكن ملاحظتها بسهولة داخل الأعصاب قطعي اليرقات.
Protocol
Discussion
ويرقات ذبابة الفاكهة الأعصاب قطعي وجود نظام قوي لدراسة آليات النقل في محواري. إذا أجري تشريح الثالثة 3 اليرقات طور مرحلي بشكل صحيح ، يمكن النظر في جميع مكونات الجهاز العصبي المركزي ، الجهاز العصبي المحيطي ، والأنسجة المرتبطة بها ، مثل العضلات وNMJs ، داخل ير?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ويؤيد الأمين العام بأموال من جامعة ولاية نيويورك في بوفالو من مؤسسة جون وOishei ر.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools, Inc. | 11252-20 | ||
| Minutien Pins, Stainless Steel | Fine Science Tools, Inc. | 26002-10 | ||
| Mcpherson-Vannas Straight Blade 8cm Scissors | Fisher Scientific | 50822236 | ||
| Vectashield, Mounting Medium | Vector Laboratories, Inc. | H-1000 | ||
| Sylgard 184 Silicone elastomer | Dow Corning Corporation | 4026148 | ||
| formaldehyde, 16% | Electron Microscopy Sciences | 15710 | ||
| dCSP3 | Developmental Studies Hybridoma Bank | |||
| Alexa Fluor 568 Goat Anti-Mouse IgG | Invitrogen | A-11004 |
References
- Gunawardena, S., Goldstein, L. Disruption of Axonal Transport and Neuronal Viability by Amyoid Precursor Protein Mutations in Drosophila. Neuron. 32 (2), 389-401 (2001).
- Gunawardena, S., Her, L. S., Brusch, R. G., Laymon, R. A., Niesman, I. R., Gordesky-Gold, B., Sintasath, L., Bonini, N. M., Goldstein, L. S. Disruption of axonal transport by loss of huntingtin or expression of pathogenic polyQ proteins in Drosophila. Neuron. 40 (1), 1-2 (2003).
- Hurd, D. D., Saxton, W. M. Kinesin mutations cause motor neuron disease phenotypes by disrupting fast axonal transport in Drosophila. 遗传学. 144 (3), 1075-1085 (1996).
- Zinsmaier, K. E., Eberle, K. K., Buchner, E., Walter, N., Benzer, S. Paralysis and early death in cysteine string protein mutants of Drosophila. Science. 263, 977-980 (1994).
