3D Культура Подвал Мембрана Анализ: Культивирование раковых клеток на 3D Подвал Мембрана Белковая матрица для изучения вторжения клеток

Published: April 30, 2023

Abstract

Источник: Цветкович, Д., и др. Количественная оценка инвазивности раковых клеток молочной железы с использованием трехмерной (3D) модели. J. Vis. Exp. (2014).

Это видео предоставляет подробную методологию для выращивания раковых клеток молочной железы в 3D мембранной мембранной белковой матрице, окстифицируя потенциал 3D-культуры в оценке вторжения клеток в окружающую среду.

Protocol

1. Трехмерная культура раковых клеток молочной железы в матрице мембран подвала (Техника встраивания) Обработка матрицы мембраны подвала Matrigel: Оттепель на льду на ночь при 4 градусов по Цельсию. Мембранная матрица подвала является жидкой при низкой температуре, но затвер?…

Representative Results

Рисунок 1. Трехмерная культура клеток рака молочной железы MDA-MB-231 в мембранной матрице подвала (техника встраивания). A-B) Схема экспериментальной установки (выполненной в дымовом капоте). C) Колодец стеклянного дна, покрытый 50 мкл мемб…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

35-mm glass-bottomed Confocal No.1 culture dishes MatTek Corporation P35G-1.0-14-C Precooled before use
Bovine serum albumin (BSA) BioShop ALB003.100 Used at 3% for IF
1.5 ml tubes VWR CA10011-700 CA10011-700
100-mm culture dish BD353003 VWR CABD353003 Sterile, disposable
15 ml Falcon tube VWR CA21008-918 Sterile, disposable
1 ml filtered tips VWR 10011-350 Sterile, disposable
200 μl filtered tips VWR 22234-016 Sterile, disposable
20 μl filtered tips VWR 22234-008 Sterile, disposable
Fetal bovine serum (FBS) Sigma F1051 Used at 10% (v/v)
RPMI 1640 Medium with Glutamine Life Technologies 11875-119 Used for culturing of MDA-MB-231 cells
MEGM (bullet kit): MEBM (CC3151)+Single quots (CC4136) Lonza CC-3150 Used for culturing of MCF10A cells
Olympus IX-81 microscope Olympus Used for 3D culture imaging (DIC images at 10X and 40X)

Play Video

Cite This Article
3D Culture Basement Membrane Assay: Culturing Cancer Cells on 3D Basement Membrane Protein Matrix to Study Cell Invasion. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20220, doi: (2023).

View Video