Denne video giver en detaljeret metode til at dyrke brystkræftceller i en 3D kælder membran protein matrix, eksemplificere potentialet i 3D-kultur i vurderingen af celleinvasion i det omgivende miljø.
Protocol
1. Tre-dimensionel kultur af brystkræftceller i Basement Membrane Matrix (Indlejringsteknikken) Håndtering matrigel kælder membran matrix: Tø på is natten over ved 4 °C. Kældermembranmatrix er flydende ved lav temperatur, men størkner ved stuetemperatur. Hold kælderen membran matrix på is(Figur 1A-B). Confocal No.1 glasbundsskålen dækkes med 50 μl kældermembranmatrix ved at sprede matrixen ved hjælp af spidsen af en P-200 Pipetman i et spiralmønster <…
Representative Results
Figur 1. Tredimensionel kultur af MDA-MB-231 brystkræftceller i kælderen membran matrix (indlejring teknik). A-B) En skematisk af den eksperimentelle opsætning (udført i røghætten). C) Brønden på den glasbundede skål belagt med 50 μl kældermembranmatrix. D) Skåle placeret i en cellekulturinkubator (ved 37 °C med 5% CO2) for at gøre det muligt for matrixen at størkne i mindst 30 min. E) Celler blev afprøvet…
3D Culture Basement Membrane Assay: Culturing Cancer Cells on 3D Basement Membrane Protein Matrix to Study Cell Invasion. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20220, doi: (2023).