Dieses Video beschreibt eine Mikroinjektionsmethode zur Verabreichung von Brustkrebszellen in den Perivitelline-Raum transgener Zebrafischembryonen. Nach der Inkubation visualisieren wir den Embryo unter einem Fluoreszenzmikroskop, um die Invasion, Verbreitung und Metastasierung von Krebszellen zu beobachten.
Protocol
1. Bild und Analyse des metastasierenden Prozesses Sammeln Sie mehrere anästhesierte Embryonen mit einer Breitspitzen-Pasteur-Pipette und übertragen Sie sie auf den Glasboden einer Polystyrolschale. Entfernen Sie überschüssiges Wasser und halten Sie eine begrenzte Menge an Eiwasser. Manipulieren Sie den Embryo in Position mit einem Haarschleifenwerkzeug und legen Sie eine Abdeckung auf das Glas. Verwenden Sie ein invertiertes konfokales Mikroskop in Kombination mit Wasse…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
Wide-tip Pasteur pipette (0.5-20 µL)
Eppendorf
F276456I
Confocal microscope
Leica
SP5 STED
Stereo microscope
Leica
MZ16FA
Tg (fli:EGFP) zebrafish strain
Kindly provided by Dr. Ewa SnaarJagalska (Institute of Biology, Leiden University, Leiden, The Netherlands)
zPDX-Analysis of Invasiveness: Investigating Invasive Behavior of Metastatic Cancer Cells in Zebrafish Embryo Xenografts. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20219, doi: (2023).