Meio Condicionado a Órgãos: Gerando Meio a partir de células de órgãos colhidos para estudos de câncer metastático
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Piaseczny, M.M., et al. Geração de Mídias e Aplicações condicionadas por órgãos para o estudo de influências específicas do órgão no comportamento metastático do câncer de mama. J. Vis. Exp.(2016).
Este vídeo descreve um método de geração de um órgão condicionado médio derivado do fígado do rato. Este sistema modelo pode ser usado para identificar e estudar fatores solúveis derivados de órgãos e seus efeitos sobre o tropismo de órgãos e comportamento metastático das células cancerosas.
Protocol
1. Geração de Mídia Condicionada pulmonar e cerebral Em uma capa de cultura tecidual estéril, inverta tubos PBS contendo pulmão ou cérebro três vezes para remover sangue residual de órgãos e aspirar PBS contendo sangue. Repita com pbs frio fresco até que a solução pareça clara sem evidência de sangue. Coloque pulmões e cérebros em placas de petri de vidro separadas de 60 mm2. Usando duas lâminas estéreis de bisturi, pulmões picados ou cérebros cortando repetidament…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 1x Phosphate-buffered saline | ThermoFisher Scientific | 10010-023 | Keep sterile |
| 60 mm2 glass petri dishes | Sigma-Aldrich | CLS7016560 | Keep sterile |
| DMEM:F12 | Life Technologies | 21331-020 | Warm in 37 °C water bath before use, keep sterile |
| Penicillin-Streptomycin (10,000 U/ ml) | Life Technologies | 15140-122 | Keep sterile |
| 50 ml conical tubes | Thermo Scientific (Nunc) | 339652 | Keep sterile |
| 0.22 μm syringe filters | Sigma-Aldrich | Z359904 | Keep sterile |
| 6-well tissue culture plates | Thermo Scientific (Nunc) | 140675 | Keep sterile |
| Scalpel blades | Fisher Scientific | S95937A | Keep sterile |
Cite This Article
Organ Conditioned Medium: Generating Medium from Harvested Organ Cells for Metastatic Cancer Studies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20218, doi: (2023).