Mezzo condizionato all'organo: mezzo generatore da cellule d'organo raccolte per studi sul cancro metastatico

Published: April 30, 2023

Abstract

Fonte: Piaseczny, M.M., et al.

Questo video descrive un metodo per generare un mezzo condizionato da organo derivato dal fegato del topo. Questo sistema modello può essere utilizzato per identificare e studiare fattori solubili derivati da organi e i loro effetti sul tropismo degli organi e sul comportamento metastatico delle cellule tumorali.

Protocol

1. Generazione di supporti condizionati al polmone e al cervello In una cappa sterile di coltura tissutale, invertire tre volte i tubi PBS contenenti polmone o cervello per rimuovere il sangue residuo dagli organi e aspirare PBS contenente sangue. Ripetere con PBS fresco freddo fino a quando la soluzione appare chiara senza prove di sangue. Posizionare polmoni e cervelli in piastre di petri di vetro separate da 60 mm2. Utilizzando due lame sterili di bisturi, polmoni tritare o cervell…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

1x Phosphate-buffered saline ThermoFisher Scientific 10010-023 Keep sterile
60 mm2 glass petri dishes Sigma-Aldrich CLS7016560 Keep sterile
DMEM:F12 Life Technologies 21331-020 Warm in 37 °C water bath before use, keep sterile
Penicillin-Streptomycin (10,000 U/ ml) Life Technologies 15140-122 Keep sterile
50 ml conical tubes Thermo Scientific (Nunc) 339652 Keep sterile
0.22 μm syringe filters Sigma-Aldrich Z359904 Keep sterile
6-well tissue culture plates Thermo Scientific (Nunc) 140675 Keep sterile
Scalpel blades Fisher Scientific S95937A Keep sterile

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Cite This Article
Organ Conditioned Medium: Generating Medium from Harvested Organ Cells for Metastatic Cancer Studies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20218, doi: (2023).

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