3D الثقافة المشتركة مع التفاعل المباشر: شارك في زراعة الخلايا السرطانية مع Monocytes لدراسة تفاعلها
Published: April 30, 2023
Abstract
المصدر: إسبينوزا سانشيز، وآخرون تحليل الاتصال بين الخلايا الأحادية والخلايا السرطانية الأولية للثدي في استخراج مصفوفة خارج الخلية (ECME) القائم على نظام ثلاثي الأبعاد. (2018).
يصف هذا الفيديو الثقافة المشتركة ثلاثية الأبعاد لخلايا سرطان الثدي مع الخلايا الأحادية لدراسة تفاعلها في بيئة قائمة على مستخلص مصفوفة خارج الخلية (ECME). تساعد هذه الطريقة في دراسة ميزات محددة مثل تدهور الكولاجين وتجنيد الخلايا المناعية وغزو الخلايا.
Protocol
1.3D الثقافات المشتركة مع التفاعل المباشر تسمية خلايا BrC و monocytes مع الأصباغ الفلورية المختلفة قبل ثقافة الخلية للسماح فرز مستقل من كل سلالة الخلية بعد الثقافة لتحليل الحمض النووي الريبي والتعبير البروتين. استخدام المشتقات المتاحة تجاريا من الكومارين ورودامين التي تمر بحرية ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| U937 | American Type Culture Collection ATCC | CRL-1593.2 | Monocytic cell line/histiocytic lymphoma |
| THP-1 | American Type Culture Collection ATCC | TIB-202 | Monocytic cell line/acute monocytic leukemia |
| MCF-10A | American Type Culture Collection ATCC | CRL-10317 | Non-transformed breast cell line |
| MCF-7 | American Type Culture Collection ATCC | HTB-22 | Breast Cancer Cell line |
| MDA-MB-231 | American Type Culture Collection ATCC | HTB-26 | Breast Cancer Cell line |
| RPMI 1640 medium | GIBCO BRL Life Technologies | 11875-093 | |
| DMEM/F12 | GIBCO BRL Life Technologies | 11039-021 | |
| Antibiotic/Antimycotic | GIBCO BRL Life Technologies | 15240-062 | 100 U/mL penicillin, 100 µg/mL streptomycin, and 0.25 µg/mL Fungizone |
| Fetal Bovine Serum | GIBCO BRL Life Technologies | 16000-044 | |
| Horse serum | GIBCO BRL Life Technologies | 16050114 | |
| 0.05% Trypsin-EDTA 1X | GIBCO BRL Life Technologies | 25300-062 | |
| PBS 1X (Phosphate Buffered Saline | GIBCO BRL Life Technologies | 20012-027 | |
| Epidermal Growth Factor (EGF) | PeproTech | AF-100-15 (1.00mg) | |
| Insulin | SIGMA-ALDRICH | I1882-100MG | |
| Hydrocortisone | SIGMA-ALDRICH | H088-5G | |
| Cholera toxin Vibrio cholerae | SIGMA-ALDRICH | C8052-1MG | |
| Matrigel | Corning Inc | 356237 | Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) mouse sarcoma, extracellular matrix extract, Store at -20°C until use at 4°C |
| Lab-Tek chamber slide with cover (8 well) | Nalge Nunc International | 177402 |
Cite This Article
3D Co-culture with Direct Interaction: Co-culturing Cancer Cells with Monocytes to Study Their Interaction. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20216, doi: (2023).