लेबल पीडीएक्स ट्यूमर कोशिकाओं के लिए ट्रांसडक्शन: स्पीतिवायरस को ट्यूमर सेल इन विट्रो में फ्लोरोसेंट मार्कर व्यक्त करना
Published: April 30, 2023
Abstract
स्रोत: हैना, सी, एट अल। ट्यूमर विकास और मेटास्टेसिस अध्ययन के लिए ट्रेस करने योग्य संवाददाताओं के साथ स्तन कैंसर रोगी-व्युत्पन्न Xenografts की लेबलिंग । जे विस एक्सप्रेस। (2016).
निम्नलिखित वीडियो लेबल (रोगी-व्युत्पन्न xenografts) पीडीएक्स ट्यूमर कोशिकाओं के लिए ट्रांसडक्शन की एक तकनीक का वर्णन करता है, जिसका उपयोग ग्रीन-फ्लोरोसेंट प्रोटीन और लूसिफ़ेरेस रिपोर्टर्स को इन विट्रो में ट्यूमर सेल में व्यक्त करने वाले लेंटीवायरस को पेश करने के लिए किया जाता है।
Protocol
1. पीडीएक्स-व्युत्पन्न ट्यूमर कोशिकाओं का ट्रांसडक्शन सेंट्रलाइज ने ट्यूमर कोशिकाओं को 300 ग्राम x 5 मिनट पर अलग किया और 2 मिलीलीटर मैमोस्फीयर मीडिया में रिसौस्पेंड किया। ट्राइपैन ब्लू अपवर्जन का उप?…
Representative Results
चित्रा 1: अलग पीडीएक्स कोशिकाओं में ट्रैकिंग ट्रांसडक्शन दक्षता। ए) पीडीएक्स-अलग कोशिकाओं को pSIH1-H1-copGFP-T2A-puro lentiviral कणों के साथ परिवर्तन के बाद मानव एपिथेलियल कोशि?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| DMEM/F12 (1:1) | Hyclone | SH30023.01 | |
| bFGF | BD Biosciences | 354060 | |
| EGF | BD Biosciences | 354001 | |
| Heparin | Sigma | H4784 | |
| B27 | Gibco/Thermo Fisher | 17504-44 | |
| Anti-fungi-antibiotics | Hyclone | SV30010 | |
| HBSS Red Ca2+/Mg2+ free | Hyclone | SH30031.02 | |
| Hepes | |||
| Cultrex | Cultrex | 3433-005-01 | Basement Matrix Extract (BME) |
| 30 °C shaker | NewBrunswick Scientific CO. INC | Series 25 Incubator Shaker |
Cite This Article
Transduction to Label PDX Tumor Cells: Introducing Lentivirus Expressing Fluorescent Marker into the Tumor Cell In Vitro. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20214, doi: (2023).