Overview
Dieses Video beschreibt eine Technik der radikalen Mastektomie, die für die chirurgische Entfernung der gesamten Brustdrüse von einer Maus verwendet wird, um die Krebsprogression zu untersuchen.
Protocol
1. Mastektomie
HINWEIS: Das Timing der Mastektomie ist sehr wichtig. Wenn dies zu früh geschieht, tritt keine Lungenmetastasierung auf. Wenn es zu spät getan wird, hat der primäre Tumor große Blutgefäße eingedrungen, die eine vollständige onkologische Resektion herausfordernd machen. So wurden mehrere Zeitpunkte auf Mastektomie getestet, um zu bestimmen, welcher Zeitpunkt das geeignete Gleichgewicht beim Warten auf Metastasen erzeugte, bevor die Resektion zu anspruchsvoll wurde. Nach mehr als 50 Mausexperimenten wurde nachgewiesen, dass die Mastektomie 8 Tage nach der Krebszellimpfung (oder wenn die Tumorgröße 5 mm erreicht) der ideale Zeitpunkt für dieses Gleichgewicht war.
- Anästhetisieren Sie eine Maus mit 2-4% Isofluran und 0,2 l/min Sauerstofffluss, bis die Mäuse ruhig atmen (2–3 min) und 0,05 mg/kg Buprenorphin subkutan in seine Schulter injizieren.
- Halten Sie die Gliedmaßen der Maus mit Laborband zurück und sterilisieren Sie ihre Haut mit Chlorhexidin, Jod und 75% Ethanol, mit Wattestäbchen.
- Machen Sie einen 5 mm Hautschnitt 2 mm links von der chirurgischen Narbe, die bei der anfänglichen Krebszellimpfung mit der Mikrodissektionsschere gemacht wurde. Erweitern Sie den Schnitt in Richtung der Wurzel des Vorderbeins, um den Tumor, die Haut einschließlich der chirurgischen Narbe und die Läsion in Kontakt mit dem Tumor zu entfernen, sowie das axilläre Lymphknotenbecken, in dem meistens kein sichtbarer Lymphknoten zum Zeitpunkt der Mastektomie existiert. Achten Sie darauf, die Axillary Vene nicht zu beschädigen.
- Schließen Sie die Hautdefekte durch Nähen, mit sterilen 5-0 nicht resorbierbaren Nähten in Form eines "Y".
- Bringen Sie die Maus in einen sauberen Käfig zurück und überwachen Sie sie, bis sie sich erholt haben und sich frei bewegen (nach 1–2 min). Wenn ein Tier innerhalb von 24 h nach einer Operation nicht in guter Gesundheit zu sein scheint, verabreichen Sie Buprenorphin (0,2 mg/kg).
- Entfernen Sie die Nähte unter Anästhesie (mit 2-4% Isofluran und 0,2 l/min Sauerstofffluss) 7 Tage nach der Operation.
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Micro Dissection Scissors | Roboz | RS-5983 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Adson Forceps | Roboz | RS-5233 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Needle Holder | Roboz | RS-7830 | For cancer cell inoculation and mastectomy |
5-0 silk sutures | Look | 774B | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Dry sterilant (Germinator 500) | Braintree Scientific | GER 5287-120V | For cancer cell inoculation and mastectomy |
Clipper | Wahl | 9908-717 | For cancer cell inoculation and mastectomy |