温度勾配アッセイ:ショ ウジョウバエ 幼虫の温度設定を試験する方法
Published: April 30, 2023
Abstract
出典: 劉, J., 他 . ショウジョウバエの熱嗜好を決定する温度勾配アッセイ. J. ヴィス・エクス (2018).
ショウジョウバエ は温度の小さな変化を区別することができ、したがって良好な熱条件を有する環境を選択することができる。このビデオでは、ショ ウジョウバエ 幼虫の温度嗜好を線形熱勾配で検定する行動アッセイについて説明します。
Protocol
このプロトコルは、劉氏らからの抜粋である。 ショ ウジョウバエ 幼虫、J.Vis.Exp. の熱嗜好を決定するための温度勾配アッセイ(2018)。 1. 温度勾配設定 単方向グラデーションの準備 アッセイ中に湿度の高い環境を作り出すために、2つの水浴に接続された2つのアルミニウムブロックを10cmで区切った濡れたペーパータオルの上に置きます(<st…
Representative Results
図1:単一および双方向の勾配アッセイの設定(A) 2つのアルミニウムブロック上に2つのアルミニウムアッセイプレートを用いた単一方向の勾配設定。アルミニウムブロックの温度は、2つの水浴から水を循環させることによって制御される。(B)3つのアルミニウムブロック、水浴およびアルミニウ…
Materials
| Gradient assay apparatus | |||
| PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath | Thomas Scientific | 9106 | This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz. |
| Aluminum assay plate (for single directional gradient) | Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized. | ||
| Aluminum plate (for bidirectional gradient) | 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized. | ||
| Aluminum block | Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D. | ||
| Connector for aluminum blocks and tubing | McMaster-Carr | 91355K82 | |
| Tygon Sanitary Silicone Tubing | Tygon | 57296 | 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Items and reagents for assay | |||
| Pestle | USA Scientific | 17361 | Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes |
| Thermometer | Fluke | 51II | |
| Thermocouple | Fluke | K type | |
| Universal microplate lid | Corning | 6980A77 | |
| 35 mm dish | Corning | 9380D40 | |
| Labeling tape (for bidirectional gradient) | Fisher Scientific | 15-951 | Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds |
| Agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 1% solution |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Prepare 18% solution right before starting assay |
| Paint brush | Fisher Scientific | 11860 | |
| 50 mL centrifuge tubes | Denville | C1062-P | |
| Scoopula | Fisher Scientific | 14-357Q | |
| 500 mL round wide-mouth bottle | Pyrex | 1395-500 | |
| Cell strainer (300 mm pore) | PluriSelect | 43-50300 | Optional item for larvae washing |
| Cardboard box (vial tray) | Genesee Scientific | FS32-124 |
Cite This Article
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).