Фиксация этанола и daPI окрашивание: метод визуализации ДНК в C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
Источник: Кларк, E. K., и др. Манипуляция Ploidy в Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2018).
Здесь мы описываем метод, используемый для визуализации геномной ДНК в фиксированных, нетронутых нематод. Видео включает в себя пример протокола для подсчета хроматина в неутилизованных C. elegans oocytes.
Protocol
Этот протокол является выдержкой из Кларк и др., Манипуляция Ploidy в Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2018). Тетраплоидные штаммы могут быть проверены путем подсчета количества хромосом в их неопыляемых ооцитах. Флуоресц?…
Materials
| Dissecting Microscope | Motic Microscopy | SMZ171 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Staining | |||
| Hoechst 33258, Pentahydrate | Biotium | 40045 | |
| DAPI | Biotium | 40011 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ethanol Fixation | |||
| Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP | Koptec, VWR | 89125-166 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| M9 Buffer | |||
| Sodium chloride, Biotechnology Grade | VWR | 97061-278 | |
| Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade | VWR | 97062-346 | |
| Sodium phosphate, monobasic dihydrate | Fisher Scientific | AC271750025 |
Cite This Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).