ショウジョウバエインビボ カルシウムイメージング:神経活動の機能的イメージング法
Published: April 30, 2023
Abstract
出典:ハンコック、C.E.、他のインビボの光カルシウムイメージングは、ショウジョウバエメラノガスターにおける学習誘発シナプス可塑性のイメージングを行った。J. ヴィス・エクス(2019).
このビデオは、GCaMPを用いたショウジョウバエニューロンにおける生体内カルシウムイメージングについて説明する。注目のプロトコルクリップは、嗅覚調節実験中にキノコの体ニューロンからのGCaMP蛍光の変化を記録する方法を示しています。
Protocol
このプロトコルは、ハンコックらからの抜粋です,学習誘発シナプス可塑性のインビボ光学カルシウムイメージング, ショウジョウバエメラノガスター, J. Vis. Exp. (2019). 1. 生体内カルシウムイメージング 赤外線レーザーと水浸漬目的( 材料表を参照)を備えた多光子顕微鏡を振動分離テーブルに取り付けて使用します。GFP ベースのカ…
Materials
| 1-Octen-3-ol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | O5284 | Chemical used as odorant |
| 3-Octanol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | 218405 | Chemical used as odorant |
| 4-Methylcyclohexanol | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | 153095 | Chemical used as odorant |
| Bandpass filter for EGFP (525/50 nm) | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | ||
| Mineral oil | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | M8410 | Used as diluent for odorants |
| Mode-locked Ti-Sapphire laser Chameleon Vision 2 | Coherent Inc., Santa Clara, CA, USA | Tunable infrared femtosecond laser | |
| Multiphoton Microscope LSM 7MP equipped with BiG detectors | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | Multiphoton microscope, multiple companies provide similar devices. | |
| Plan-Apochromat 20x (NA = 1.0) water immersion objective | Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany | 421452-9900-000 | Objective W "Plan-Apochromat" 20x/1.0 DIC M27 70mm |
| Visual Basics of Applicatons (VBA) software to receive a trigger from the odor-delivery device and the electric shock application device (power supply) to interact with the ZEN software from Zeiss that controls the microscope | Custom-written and available upon request | n.a. | n.a. |
Cite This Article
Drosophila In Vivo Calcium Imaging: A Method for Functional Imaging of Neuronal Activity. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20129, doi: (2023).