Montagem de cérebros de drosophila adultos: um método para preparar slides para imagens confocal
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Kelly, S.M., et al. Dissecção e Coloração Imunofluorescente de Corpo de Cogumelo e Neurônios Fotorreceptores em Cérebros melanogaster de Drosophila adultos. J. Vis. Exp. (2017).
Este vídeo descreve um método de montagem de cérebros intactos de moscas adultas sob um escorregador de ponte e mostra o protocolo realizado em cérebros imunossundo para microscopia fluorescente.
Protocol
Este protocolo é um trecho de Kelly et al., Dissecção e Coloração Imunofluorescente de Corpo de Cogumelo e Neurônios Fotorreceptores em Cérebros melanogaster drosophila adulto, J. Vis. Exp. (2017). 1. Montagem cérebros adultos D. melanogaster em slides e imagens de microscópio Construa um slide de “ponte”. Posicione duas tampas “base” de aproximadamente 1 cm de distância em um slide carregado positivamente. Certifique-se de que o lado car…
Representative Results
Figura 1: Montagem de cérebros em preparação para a imagem de imunofluorescência. (A) Os cérebros são montados em slides SuperFrost Plus com uma tampa de ponte para evitar o achatamento dos cérebros. Dois deslizamentos de cobertura “base” são aderidos a um slide Superfrost Plus carregado positivamente com polimento de unhas claras e cérebros dissecados são então colocados no slide entre eles. U…
Materials
| Microdissection forceps/tweezers | Ted Pella | 505-NM | |
| VectaShield | Vector Labs | H-1000 | |
| SuperFrost Plus Slides | ThermoFisher | 99-910-01 | |
| Coverslips | ThermoFisher | 12-553-454 | |
| fingernail polish | Electron Microscope Services (EMS) | 72180 | |
| stereomicroscope | Leica S6D with KL300 LED light source | ||
| Kimwipe | Fisher | 06-666 |
Cite This Article
Mounting Adult Drosophila Brains: A Method to Prepare Slides for Confocal Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20106, doi: (2023).