B細胞のCD40 -活性化のモデルマウス

B細胞の研究は、CD40の活性化が、その抗原提示能を改善することが示されています。インターロイキン-4およびCD40リガンド（CD40L）で刺激したとき、ヒトB細胞は、高純度のCD40 – B細胞の非常に大きな金額に14日以内に末梢血の少量から困難なく拡張することができます（> 10<sup> 9</sup健康なドナーだけでなく、癌患者から患者あたり>細胞）^1月4日。 CD40 – B細胞が重要なリンパ節ホーミング分子を発現し、T細胞を引き付けることができる<em> in vitroで</em⁵。さらに彼らは、効率的にT細胞に、プロセスと存在する抗原を取る^6,7。 CD40 – B細胞は素数ナイーブではないだけに示して、だけでなく、メモリーT細胞を展開していた^8,9。したがって、CD40活性化B細胞（CD40 – B細胞）の細胞ベースのimmunotherapy1、5,10のための免疫刺激抗原提示細胞（APC）の代替源として研究されている。 CD40 – B細胞はin vivoで効果的なT細胞応答を誘導し、我々はマウスのCD40活性化B細胞の産生のために細胞培養系を確立し、基礎となるメカニズムを研究するかどうかをさらに研究するために。脾細胞を用いてまたはCD40 -活性化のためのC57BL / 6マウス由来のB細胞を精製し、最適な条件は次のように同定された：C57BL / 6マウス（ハプロタイプH – 2b）はリンパ球の脾臓細胞からの起動は、密度勾配遠心法により精製し、HeLa細胞と共培養されています組換えマウスCD40リガンド（tmuCD40L HeLa細胞）を発現する細胞¹¹。細胞は3-4日ごとにreculturedされており、そのようなCD40L、インターロイキン-4のような主要なコンポーネントは、-メルカプトエタノールおよびサイクロスポリンが補充されています。このプロトコルでは、ヒトCD40 – B細胞（図1A、B）と同様のAPC -表現型と完全に活性化マウスCD40 – B細胞を（mCD40B）を取得する方法を示しています。 CD40刺激は、急速な伸長や細胞培養の14日以内に高純度（> 90％）CD19 + B細胞（図1C、D）の拡大につながる。非トランスフェクト細胞の混入を避けるために、トランスフェクタントでマウスCD40リガンドの発現は、（図2）定期的に制御する必要があります。マウスCD40活性化B細胞はB細胞の活性化と分化と同様にin vitroおよびin vivoにおけるAPCとして機能する潜在能力を調査するための研究に使用することができます。また、彼らは腫瘍に対する治療剤又は予防接種を確立するための有望なツールを示しており、このアプローチの安全性と免疫原性に関する質問に答えるために役立ちます。¹²。