التكامل الأساسي بين الأزواج الأساسية الثلاثة من كودون mRNA و tRNA مضاد الكودون ليس آلية آمنة من الفشل. يمكن أن تتراوح الأخطاء من عدم تطابق واحد إلى عدم وجود اقتران أساسي صحيح على الإطلاق. فرق الطاقة الحرة بين القاعدة الصحيحة والصحيحة تقريبًا يمكن أن تكون الأزواج صغيرة مثل 3 كيلو كالوري/مول. مع كون التكامل هو خطوة التدقيق اللغوي الوحيدة، فإن تكرار الخطأ المقدر سيكون حمض أميني خاطئ واحد في كل 100 حمض أميني متضمن.ومع ذلك، فإن ترددات الخطأ التي لوحظت في الكائنات الحية أقل بكثير.
يتم ضمان المستوى العالي من الدقة من خلال خطوتين إضافيتين في التدقيق النسخي تتضمن مبدأين من تفاعلات الركيزة الإنزيمية.
داخل الريبوسوم، يحفز مركز ترانسفيراز الببتيدل (PTC) تكوين الرابطة التساهمية بين الأحماض الأمينية لتشكيل سلسلة بولي ببتيد. مثل أي إنزيم آخر، يحتوي PTC أيضًا على موقع نشط يميز بين الركائز بناءً على هيكلها الجزيئي. تشكل المخلفات من RNA الريباسي 16S للوحدة الفرعية الريبوسومية الصغيرة روابط هيدروجينية مع ذرات القاعدة والعمود الفقري للزاوية المزدوجة من كودون ومضاد الكودون. يمكن فقط للحمض النووي الريبي الصحيح إحداث تغييرات توافقية في PTC ، الذي ينفذ التحفيز.
تحدث الخطوة الثانية، التي تسمى التصحيح الحركي، بعد التفكك النهائي لـ EF-Tu & # 183 ؛ الناتج المحلي الإجمالي من الريبوسوم. يمثل التحلل المائي GTP بداية تأخير زمني قصير ينتقل خلاله أمينوأسيل-tRNA إلى الموقع النشط لـ PTC للتحفيز. خلال هذا التأخير، من المرجح أن تنفصل أي أزواج غير صحيحة من الكودون والمضاد الكودون التي انزلقت خلال خطوة الملاءمة المستحثة عن الأزواج الصحيحة. والسبب في ذلك هو أن الحمض النووي الريبي الخاطئ يصنع أزواجًا أضعف من القواعد مع الكودون، ويكون التأخير الزمني أطول في حالة التطابقات غير الصحيحة.
